时间分辨荧光免疫分析仪阅读：1782

　　1、使用环境：将仪器置于水平、稳固、洁净的地方。自然环境中稀土离子存在十分广泛，如空气灰尘和烟雾中，均有不同程度的含量，尤以北方地区为甚，所以应建立一个相对无尘的操作环境，防止器材、试剂和操作者在操作中不慎可能造成的污染。

　　2、操作时按照实验室安全工作准则，戴手套穿工作服，不得戴首饰，以避免潜在的危险；在实验中应该注意用电安全，不得触及带电部分；标本及其他废弃物的处理应遵守实验室相关规定，注意生物安全。

　　3、严格遵守操作规程，如仪器出现故障，立即向管理责任人或科室负责人报告，查明原因，及时处理，不得擅自“修理”，应登记“仪器设备使用登记”本。

　　4、当仪器不处于STANDBY或关机状态时，不能触及加样针、搅拌棒等仪器运动部分。

　　5、将血清标本吸入样品杯时，避免产生气泡或吸人凝块。

　　6、铕标记物是提高灵敏度、降低非特异性结合的关键，受标记方法、抗体浓度、稀土元素或其螯合物质量及标记中带来不均一性影响，每批标记物质量都有一定的差异，因此不同批号标记物敏感性不一，不能混用，且每次测定都需作标准曲线。

　　7、时间分辨荧光免疫分析技术的免疫反应与其他免疫反应的条件一样，易受pH、温度、时间等因素的影响。且TRFIA的免疫反应是在室温状态下不断振荡完成的，所以反应的室温等环境影响因素应严格控制。

　　8、TRFIA技术由于灵敏度极高，许多因素能够影响其准确度，因此在每一步的操作中都应严格按照操作规程进行操作。

　　优点：使用镧系元素作为标记物，其在保证检测的灵敏度和特异性的基础上，通过时间分辨技术消除了背景荧光的干扰。检测多种抗原时可使用多种荧光素进行标记抗体，且灵敏度（标记物为Eu3+的检测灵敏度为10-18mol/well）和特异性均较高，较其他分析方法好。还有标准曲线剂量范围宽、自动化程度高、操作简便等许多优点。

　　缺点：试剂盒昂贵和易受内源性或外源性稀土离子的污染。

　　时间分辨荧光免疫分析仪常用于蛋白质和多肽激素、半抗原、病原体抗原抗体、肿瘤标志物分析、干血斑样品、核酸及天然杀伤细胞的活力等方面的测定。

　　时间分辨技术，即各种组织、蛋白或其他化合物在激发光的照射下都能发出一定波长的荧光，如血清蛋白可发射出短波长的荧光（激发光波长280nm，发射光波长320~350nm），胆红素发出波长较长的荧光（激发光波长330~360nm，发射光波长430~470nm），这些荧光为非特异性荧光，干扰了荧光免疫测定的灵敏度和特异性，但它们的荧光寿命一般在1~10ns，最长不超过20ns。而镧系元素的荧光寿命为10~100?s，时间分辨荧光免疫分析技术（time resolved fluorescence immunoassay，TRFIA）利用这一特征，待血清、溶剂和其它成分的短寿命背景荧光完全衰变后，再测量镧系元素的特异性荧光，有效地排除了非特异荧光的干扰，极大地提高了分析灵敏度。