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分子杂交仪(又名:分子杂交箱、分子杂交炉)广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断上的应用也日趋增多。
1.分子杂交仪需要安装在有良好接触的电源插座上。
2.恒温室处于高温状态装取杂交管时,注意不要烫伤!
3.杂交管在装入反应液前一定要清洗干净,装入反应液及反应膜后一定要拧紧瓶盖,以免漏夜。
4. 在进行同位素标记的杂交实验时,必须检查杂交管的密封情况,以免造成污染。一旦发生污染,请及时告知有关部门的使用人员和检修人员,尽可能的减少不必要的伤害。
由于分子杂交仪设计结构紧凑,密封性要求高,所以在仪器运行中出现故障需要检修时,应切断电源由专业技术人员进行。
根据实验的需求,可以将分子杂交仪分为5大类。
1、是用于大容量的分子杂交仪;
2、用于Southern或者Northern技术点杂交的杂交仪;
3、用于小容量的核酸杂交仪;
4、微孔板原位杂交仪;
5、载玻片原位杂交和平板杂交仪;
6、Western杂交仪。
原位分子杂交,斑点分子杂交,所用的分子杂交箱是振荡式的摇床分子杂交箱;Southern、Northern、Western杂交,所用的杂交仪是旋子式杂交仪,仪器采用独特的滚动式反应架装置,配套特制密封杂交管在水平轴上旋转,使杂交管内壁上的杂交反应膜各处能均匀地杂交液反复地接触,充分反应。
功能能齐全的分子杂交仪仪器部件有:箱体、杂交瓶转架或离心管转架、杂交管、摇床、隔膜、电脑控制系统等部件组成。可用于Southern、Northern、Western等分子杂交,还可以用于原位杂交。不同型号的箱体容纳的管子数,微孔版数,载波片数和平板数也不同。分子杂交仪的结构和功能。
功能能齐全的分子杂交仪都有一下功能:微电脑智能控制,液晶显示三种功能(温度显示、瓶架旋转速度、托盘摆动速度)。具有存储记忆功能,可以直观显示系统的运行状况。温度控制采用数字PID技术,输出采用PWM方式,控温精度高,稳定性好,并设有超温保护装置,该仪器可以同时直观箱内控温温度,滚动式瓶架旋转速度,酶标板或试剂托盘的摆动速度。同时任意选择您所需要的控温温度,瓶架旋转速度,摇床摆动速度。
分子杂交仪其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子(heteroduplex)。杂交双链可以在DNA与DNA链之间,也可在RNA与DNA链之间形成。
核酸分子杂交是基因诊断的最基本的方法之一。它的基本原理是:互补的DNA单链能够在一定条件下结合成双链,即能够进行杂交。这种结合是特异的,即严格按照碱基互补的原则进行,它不仅能在DNA和DNA之间进行,也能在DNA和RNA之间进行。因此,当用一段已知基因的核酸序列作出探针,与变性后的单链基因组DNA接触时,如果两者的碱基完全配对,它们即互补地结合成双链,从而表明被测基因组DNA中含有已知的基因序列。由此可见,进行基因检测有两个必要条件,一是必需的特异的DNA探针;二是必需的基因组DNA。当两者都变性呈单链状态时,就能进行分子杂交。
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