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核酸凝胶电泳阅读:1945

    生物大分子在一定pH条件下,通常带电荷,将其置于电场中,会以一定的速度向与其电荷性质相反的电极迁移,迁移速度称电泳速率。

固体支持介质

    琼脂糖(agarose)

    聚丙烯酰胺(polyarylamide)

电泳的基本原理

    生物大分子在一定pH条件下,通常带电荷,将其置于电场中,会以一定的速度向与其电荷性质相反的电极迁移,迁移速度称电泳速率。

    电泳速率与电场强度、分子所带的净电荷数成正比,与分子与介质的摩擦系数成反比。 摩擦系数与分子的大小、构型及介质的粘度有关。

    在生理条件下,DNA分子糖-磷酸骨架中的磷酸基团呈离子化状态,故DNA实际上呈多聚阴离子状态,在电场中向 正极方向迁移。

    糖-磷酸骨架在结构上重复,故等量的双链DNA几乎带等量的净电荷。

    如电场强度一定、电泳介质相同,电泳速率就取决于核酸分子的大小和构型。 构型相似的分子:分子量越大、迁移越慢。

    分子量相同的分子(如质粒):

    cccDNA迁移最快、L-DNA次之、ocDNA最慢。

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