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　　根据废水浓度高低及毒性大小确定使用稀释水、接种水还是稀释接种水，若稀释比大于100，将分两步或几步进行稀释。
　　培养时要注意避光，防止藻类生长影响测定结果。
　　其他注意事项参见本书第二章《实验六水溶解氧（DO）的测定》中（7.2~7.6）。

　　不经稀释直接培养的水样
　　BODs=DO1－DO2
　　BODs——水样的BOD5值，mg/L
　　DO1：水样在培养前的溶解氧浓度，mg/L
　　DO2：水样在培养五天后的溶解氧浓度，mg/L
　　经稀释后培养的水样2121215)()(ffBBCCBOD×---=
　　C1——水样在培养前的溶解氧浓度，mg/L
　　C2——水样在培养五天后的溶解氧浓度，mg/L
　　B1——稀释水（或接种稀释水）在培养前的溶解氧浓度，mg/L
　　B2——稀释水（或接种稀释水）在培养五天后的溶解氧浓度，mg/L
　　f1——稀释水（或接种稀释水）在培养液中所占比例
　　f2——水样在培养液中所占比例1

　　实验前准备工作
　　实验前8h将生化培养箱接通电源，并使温度控制在20℃下正常运行。
　　将实验用的稀释水、接种水和接种的稀释水放入培养箱内恒温备选用。
　　水样预处理
　　水样的pH值不在6.5~7.5之间时；先做单独试验，确定需要的盐酸（5.10）或氢氧化钠溶液（5.9）
　　体积，再中和样品，不管有无沉淀形成。当水样的酸度或碱度很高，可改用高浓的碱或酸进行中和，确保用量不少过水样体积的0.5%。
　　含有少量游离氯的水样，一般放置1-2h后，游离氯即可消失。对于游离氯在短时间内不能消失的水样，可加入适量的亚硫酸钠溶液，以除去游离氯。
　　从水温较低的水体中或富营养化的湖泊中采集的水样，应迅速升温至20℃左右，以赶出水样中过饱和的溶解氧。否则会造成分析结果偏低。
　　从水温较高的水体中或废水排放口取样，应迅速使其冷却至20℃左右，否则会造成分析结果偏高。
　　若待测水样没有微生物或微生物活性不足时，都要对样品进行接种。诸如以下几种工业废水：
　　a、未经生化处理过的工业废水；
　　b、高温高压或经卫生杀菌的废水，特别要注意食品加工工业的废水和医院生活污水；
　　c、强酸强碱性的工业废水；
　　d、高BOD5值的工业废水；
　　e、含铜、锌、铅、砷、镉、铬、氰等有毒物质的工业废水。
　　以上的工业废水都需采用具有足够微生物。

　　采用分析纯试剂。实验用水采用重蒸蒸馏水。
　　硫酸锰溶液
　　将MnSO4·4H2O480g或MnSO4·2H2O400g溶于蒸馏水中，过滤后稀释成00mL。(此溶液中不能含有高价锰，试验方法是取少量此溶液加入碘化钾及稀硫酸后溶液不能变成黄色，如变成黄色表示有少量碘析出，即表示溶液中含有高价锰)。
　　MnO+2I-+6H+=I2+Mn2++3H2O-23
　　碱性碘化钾溶液
　　溶解500g氢氧化钠于300—400mL蒸馏水中，冷至室温。另外溶解300g碘化钾于200mL蒸馏水中，慢慢加入已冷却的氢氧化钠溶液，摇匀后用蒸馏水稀释至000mL(强碱性溶液腐蚀性很大，使用时注意勿溅在皮肤或衣服上)，如有沉淀，则放置过夜取上清液，贮藏于塑料瓶或棕色试剂瓶中（用棕色试剂瓶时要用橡胶瓶塞）。
　　浓硫酸
　　比重.84，强酸腐蚀性很大，使用注意勿溅在皮肤或衣服上。
　　%淀粉指示液
　　称取2g可溶性淀粉，溶于少量蒸馏水中，用玻璃棒调成糊状：慢慢加入(边加边搅拌)刚煮沸的200mL蒸馏水中，冷却后加入0.25g水杨酸或0.8g氯化锌ZnCl2防腐剂。此溶液遇碘应变为蓝色，如变成紫色表示已有部分变质，要重新配制。
　　(+)硫酸溶液
　　将浓硫酸(比重．84)与水等体积混合。
　　mol/L(/2H2SO4)
　　7盐溶液
　　下述溶液至少可稳定一个月，应贮存在玻璃瓶内，置于暗处。一旦发现有生物滋长迹象，则应弃去不用。
　　磷酸盐：缓冲溶液。
　　将8.5g磷酸二氢钾(KH2PO4)、75g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g七水磷酸氢二钠(NaH2PO4·7H2O)、和.7g氯化铵（NH4Cl）溶于500mL水中，西是指000mL。
　　此缓冲溶液的pH应为7.2。
　　七水硫酸镁：25g/L溶液
　　将25g七水硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至000mL并混合均匀。
　　氯化钙：27.5g/L溶液
　　将27.5g无水氯化钙（CaCl2）（若用水合氯化钙，要取相当的量）溶于水，稀释至000mL并混合均匀。
　　0.25g/L溶液
　　将0.25g六水氯化铁（Ⅲ）（FeCl3·H2O）溶解于水中，稀释至000mL并混合均匀。
　　硫代硫酸钠溶液C(Na2S2O3)=0.025mol/L
　　称取6.2g硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O)溶于煮沸放冷的蒸馏水中，加入0.2g碳酸钠，用水稀释至000mL。贮于棕色瓶中，使用前用重铬酸钾，C(/6K2Cr2O7)=0.0250mol/L标准溶液标定，标定方法如下。
　　于250mL碘重瓶中，加入l00mL蒸馏水和g碘化钾，加入0.00mL0.0250mo/L重铬酸钾标准溶液，5mL2mol/L(/2H2SO4)硫酸溶液(6)，密塞，摇匀，于暗处静置5min后，用待标定的硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入mL淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好褪尽为止，记录用量。
　　标定反应：K2Cr2O7+6KI+7H2SO4=Cr2(SO4)3+32+4K2SO4+7H2O
　　(硫酸铬，绿色)
　　I2+2Na2S2O3=2NaI+Na2S4O6
　　(连四硫酸钠，无色)
　　C=0.00×0.0250/V
　　式中C——硫酸钠溶液浓度(mol/L)
　　V——硫代硫酸钠溶液消耗量(mL)
　　氢氧化钠，0.5mol/L
　　盐酸，0.5mol/L
　　稀释水
　　在5-20L玻璃内瓶装入一定量的纯水曝气2-8h，使稀释水的溶解氧接近饱和；曝气后瓶口盖上两层干净纱布，置于20℃培养箱中放置数小时，使水中溶解氧含量不少于8mg/L。临用前每升水中加入四种营养盐溶液(7.)、(7.2)、(7.3)、(7.4)各lmL并混合均匀。稀释水的pH值为7.2，应在8h内使用完。
　　接种水
　　如被检验样品本身不含有足够的适应性微生物，应采取下述方法获得接种水。接种温度应在20±l℃。
　　城市污水，一般采用住宅区生活污水，过滤后在20℃培养箱内放置一昼夜，取上清液作为接种水。
　　待测样品经生化处理构筑物的出水处的出水。
　　当工业废水中含有难降解有机物时，取该工业废水排放口下游3-8Km处的水作为做接种水；如无此种水源采用驯化菌种的方法在实验室培养含有适应于待测样品的接种水，建议采用如下方法：取中和或适当稀释后的该水样进行连续曝气，每天加少量新鲜水样。同时加入适量表层土壤、花园土壤或生活污水，使能适应水样的微生物大量繁殖。当水中出现大量絮状物，或分析其化学需氧量的降低值出现突变时，表明适应的微生物已经繁殖，可用做接种水。一般驯化过程需要3-8d。
　　接种的稀释水
　　根据需要和接种水的来源，向每升稀释水（）中加入.0~0mL接种水（2）中的一种。
　　以接种的稀释水的5天（20℃）耗氧量应在0.3~.0mg/L之间。

　　生化培养箱温度控制在20±l℃，可连续无故障运行。
　　充氧设备充氧动力常采用无油空气压缩机(或隔膜泵、或氧气瓶、或真空泵)。充氧流程可分为正压、负压充氧两种流程。
　　BOD培养瓶：容积550±1mL。
　　样品运输贮藏箱：温度保持0~4℃。
　　250mL溶解氧瓶或具塞试剂瓶2~6个。
　　50mL滴定管2支。
　　1mL移液管3支，25mL、100mL移液管各1支。
　　10mL、100mL量筒各1个。
　　250mL碘量瓶2个。