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荧光定量仪是一种利用物质在特定波长激发光照射下发射荧光的特性，对目标分子（如DNA、RNA、蛋白质、细胞、污染物等）进行高灵敏度、高选择性定量分析的精密光学仪器。
1.核酸定量荧光仪
用途：精准测定微量DNA/RNA浓度（尤其适用于低浓度、含杂质样本）。
常用染料：PicoGreen（dsDNA）、RiboGreen（RNA）、SYBR Safe等。
优势：不受游离核苷酸、蛋白质、盐类干扰，适用于NGS文库、qPCR模板质检。
典型设备：Thermo Fisher Qubit系列、Invitrogen Qubit Flex、国产“蓝光”系列。
2.蛋白/细胞荧光定量仪
用途：检测蛋白质含量（如NanoOrange染料）、细胞活性（Calcein-AM）、钙离子浓度（Fluo-4）等。
应用：药物筛选、细胞毒性实验、信号通路研究。
3.微孔板荧光检测仪（多功能酶标仪）
特点：支持96/384孔板，可同时测荧光（FL）、发光（Luminescence）、吸光度（Abs）。
应用：高通量筛选、ELISA、报告基因检测、微生物检测。
代表品牌：BioTek Synergy、Tecan Infinite、PerkinElmer EnSpire。
4.便携式/现场荧光检测仪
用途：水质中多环芳烃（PAHs）、石油类污染物、叶绿素a、藻毒素等现场快速检测。
特点：小型化、电池供电、IP防护等级高。
标准方法：如EPA Method 445.0（叶绿素）、HJ 875-2017（水中石油类）。
荧光定量仪基于荧光检测原理：
1.激发：样品中的荧光物质（天然或经染料标记）被特定波长的光源（如LED、氙灯或激光）激发；
2.发射：受激分子跃迁至高能态后返回基态，释放出波长更长的荧光；
3.检测：光电倍增管（PMT）或CCD传感器接收发射荧光，将其转换为电信号；
4.定量：荧光强度与目标物浓度在一定范围内呈线性关系，通过标准曲线实现精确定量。
1.避免光漂白：荧光染料对光敏感，样品应避光保存，检测过程尽量缩短曝光时间。
2.背景校正：必须设置空白对照（仅含缓冲液+染料），扣除本底荧光。
3.线性范围验证：确保样品浓度落在标准曲线线性区间内，过高需稀释。
4.定期校准：使用标准荧光微球或参考物质（如fluorescein）验证仪器稳定性。
5.清洁光学部件：镜头、滤光片积尘会显著降低信号强度。
1.检测目标与灵敏度要求
核酸定量需达pg/μL级（如Qubit可测0.5 pg/μL dsDNA）；
环境污染物可能需ppb级检测限。
2.激发/发射波长范围
确认仪器覆盖所用荧光染料的Ex/Em波长（如PicoGreen：Ex 480 nm/Em 520 nm）；
宽波长范围（如200–900 nm）适合多用途实验室。
4.样品通量与形式
单管检测（如Qubit）适合少量样本；
微孔板机型适合高通量需求；
有些支持毛细管、比色皿、滤膜等多种载体。
5.自动化与数据管理
是否支持自动校准、标准曲线拟合、数据导出（CSV/PDF）；
高端机型可连接LIMS系统，满足GLP/GMP要求。
6.操作便捷性与成本
便携式设备适合野外，但功能有限；
专用核酸定量仪操作简单、耗材封闭（如Qubit专用试剂管），但长期成本较高；
开放式平台（如酶标仪）灵活性强，但需自行优化实验条件。
