圆二色光谱仪阅读：355

　　圆二色光谱仪的原理基于圆二色性，即当平面偏振光通过具有旋光活性的介质时，由于介质中同一种旋光活性分子存在手性不同的两种构型，它们对平面偏振光所分解成的右旋和左旋圆偏振光吸收不同，从而产生圆二色性。这种原理使得圆二色光谱仪能够分析物质的旋光性，进而研究物质的构象和结构。圆二色光谱仪广泛应用于生物学、农学、水产学、食品科学技术等领域，通过测定蛋白质等生物分子的圆二色性，可以快速、简单地获取其二级结构信息，这对于理解蛋白质的功能和相互作用具有重要意义。

　　一、准备工作

　　在开始操作圆二色光谱仪之前，需要完成以下准备工作:

　　1.样品制备:根据研究目的选择相应的溶剂，将待测的有机化合物溶解于其中，注意控制浓度。同时，确保样品中没有杂质或者其他干扰物。

　　2.刷洗样品池:使用纯水和酒精对样品池进行彻底清洗，以确保无杂质残留。避免使用有机溶剂，以免对后续实验产生干扰。

　　3.仪器预热:启动圆二色光谱仪，并按照厂家的指示预热仪器至指定温度。通常情况下，建议将仪器预热至室温

　　二、校准仪器

　　在进行实际测量之前，需要对圆二色光谱仪进行校准，以确保测量结果的准确性。校准的具体步骤如下:

　　1.空白校准:在样品池中加入相同溶剂但不含有机化合物的空白样品:按照仪器操作手册的指示，进行空白校准，以消除系统本底的影响。

　　2.参考物质校准:选择合适的参考物质，如D-葡萄糖酸钠。将参考物质溶解于相同溶剂中，加入样品池，按照仪器操作手册的指示进行参考物质校准。

　　三、测量样品

　　完成仪器的校准后，可以进行样品的测量。具体操作步骤如下:

　　1.操作参数设定:根据样品的性质和研究目的，设置合适的操作参数。例如，选择适当的波长范围、光强等参数。

　　2.样品测呈:将待测样品溶液加入样品池中，确保样品池的表面平整没有气泡，将样品池放入圆二色光谱仪的样品室中。

　　3.测量记录:按下开始测量按饥，圆二色光谱仪会自动记录样品的圆二色信号。在测量过程中，避免干扰，保持实验室环境的稳定。

　　4.清洗样品池:在每次测量完毕后，使用纯水和酒精对样品池进行彻底清洗，以避免污染。

　　四、数据处理与分析

　　完成样品的测量后，可以进行数据处理有分析，以获取有关样品结构和构象的信息，具体步骤如下:

　　1.数据导出:将测量得到的原始数据导出为适当的格式，如文本文件或 Excel 文件。

　　2.数校正:根仪器的响应性能，对数进行正，消除背景噪声等

　　3.数据分析:根据所研究的问题和已有知识，对数据进行合理的分析，如绘制CD曲线、计算济液中有机化会物的各向异性等。

　　4.结果解读:根据数据分析结果，对样品的结构和构象进行解读和讨论，得出研究结论。

　　五、仪器维护

　　操作完成后，需要对圆二色光谱仪进行适当的维护，以保证仪器的正常运行。

　　1.清洁仪器:使用纯水和酒精对仪器进行清洁，除去样品残留和污垢。注意不要在仪器上留下水珠。

　　2.关闭仪器:按照仪器操作手册的指示，正确关闭圆二色光谱仪，避免损坏设备。

　　圆二色光谱仪可以在温度变化的同时得到全波长范围的圆二色谱、紫外吸收光谱、荧光光谱、相变温度Tm、相变的热力学焓变△H 等多维度的表征参数， 从而判断生物大分子的结构、稳定性、药物体系的组方优化和筛选。通过体系的CD变化与温度变化的相关关系而得到的构象变化信息， 比微量量热学的表达更灵敏、分辨更清晰。

　　1. 光源:150W氙灯。

　　2. 分光原理：双偏振式棱镜方式。

　　3. 波长范围:不窄于 170nm – 900nm，单检测器。

　　4. 波长准确度：±0.1nm (170——500nm)，±0.5nm (500——900nm) 。

　　5. 波长重复性：优于±0.05nm (160——500nm)，±0.1nm (500——900nm) 。

　　6. 杂散光: ＜ 3ppm (200nm)。

　　7.分辨率: ＜ 0.00001。

　　8. 噪音水平： 0.07mdeg @ 175nm； 0.03mdeg @ 180nm； 0.09mdeg @ 750nm。

　　9. 测量范围：≥±9000m°(提供实际样品测试数据作为支持材料)；测量CD值没有上限。

　　10. 样品位置光束（光通量）：≥1.5X1013 photons/sec(在常温常压的实验室条件下，在180nm，1nm带宽条件下检测) 。

　　11. 在常温常压的实验室条件下，在180nm检测蛋白质及多肽样品并获取有效数据时吹扫气体用量不大于5升/分钟。

　　12. 主机包含圆二色光谱、紫外可见吸收光谱、线二色谱、FDCD光谱检测功能； 13. 主机可扩展功能：可。