孔板梯度稀释仪阅读：41

　　1.自动化程度高：用户只需将待稀释的溶液装入样品槽中，选择所需的稀释比例，仪器即可自动完成稀释过程，大的提高了实验效率，减少了人为操作误差。

　　2.高精度稀释：能准确控制液体的转移量和混合程度，确保稀释结果的准确性和可重复性，避免了人为操作中可能出现的误差。

　　3.减少试剂浪费：通过孔板的优化设计，可准确控制稀释液的用量，减少化学试剂的浪费。

　　4.适用范围广：适用于各种实验室孔板，支持多种微生物机架和容器，可满足不同实验需求。

　　5.灵活的实验设计：支持自定义稀释方案(如非整数倍稀释、多组分混合稀释)，满足特殊实验需求。

孔板梯度稀释仪的工作原理基于精确的液体转移与混合技术，通过预设程序控制移液系统在微孔板中按特定模式进行液体分配、混合和转移，从而实现连续或非连续的浓度梯度。

　　1.实验前准备

　　环境检查：确保仪器放置在稳固、水平、无强振动、无强电磁干扰的台面上。环境温度、湿度应符合仪器要求。

　　耗材准备：准备好无菌、无热原的吸头（Tip）、深孔板（Source Plate）、微孔板（Destination Plate/Assay Plate）、稀释液（如缓冲液、水）和待稀释的样品。确保吸头与移液器（或移液头）完全匹配。

　　软件准备：打开电脑和仪器电源，启动控制软件。根据实验需求，创建或加载预设的梯度稀释程序。程序需明确定义：

　　源板（样品和稀释液）的位置。

　　目标板（进行稀释的微孔板）的位置。

　　稀释因子和稀释级数。

　　起始浓度和最终体积。

　　移液模式（如单通道/多通道、正向/反向移液）。

　　混匀参数（次数、体积）。

　　吸头使用策略（如一次性使用或可重复使用，通常为一次性）。

　　硬件设置：

　　将源板、目标板和吸头盒正确放置在仪器指定的托盘位置，并在软件中确认位置。

　　安装并校准移液头（如果需要）。

　　进行吸头装载，确保所有通道的吸头都已正确、牢固地安装。

　　2.校准与验证

　　吸头校准：运行吸头校准程序，确保移液头能准确找到并拾取吸头。

　　板位置校准：运行板位置校准（或使用探针进行Z轴校准），确保移液头能准确到达每个孔的底部或指定高度，避免碰撞。

　　体积验证(推荐定期进行)：使用称重法或其他校准工具，验证关键移液体积（如最大、最小体积）的准确性。

　　3.运行程序

　　双重检查：再次核对软件程序设置、耗材位置和类型。

　　开始运行：在软件中启动程序。仪器将自动执行以下操作：

　　吸取样品：从源板的指定孔中吸取初始浓度的样品。

　　转移至第一稀释孔：将样品转移到目标板的第一个孔（通常已预装稀释液）。

　　混匀：在第一个孔中进行多次吸排（Aspirate/Dispense）以充分混匀。

　　梯度转移：从第一个孔吸取混合液，转移到第二个孔（含稀释液），混匀。此过程按程序设定的梯度因子和级数依次进行。

　　吸头处理：每次移液后，根据程序设置，丢弃使用过的吸头或（在极少数可重复使用设计中）进行清洗。

　　过程监控：在程序运行期间，观察仪器是否正常工作，有无异常声音、碰撞或漏液。

　　4.实验后处理

　　结果检查：程序完成后，检查目标板中液体的分布是否均匀，有无溢出或气泡。

　　关闭软件：保存实验日志和程序。

　　清理：小心取出目标板进行后续分析。丢弃用过的吸头、源板（如为一次性）和其他一次性耗材。清洁可重复使用的容器。

　　表面清洁：使用柔软的无尘布蘸取70%乙醇或温和的清洁剂擦拭仪器外部表面和内部非电子部件，去除灰尘和潜在污染物。切勿让液体流入仪器内部。

　　废液处理：清空废液容器。

　　吸头盒/耗材架：清理残留的吸头碎片或灰尘。

　　检查：快速检查管路（如有）有无泄漏，机械臂运动是否顺畅。

　　2.每周/定期维护

　　深度清洁：对仪器内部（在断电并遵循安全规程下）进行更彻底的清洁，特别是移液头下方、托盘区域。

　　移液头维护(如适用)：如果是可拆卸移液头，检查密封圈（O-ring）有无磨损、老化，必要时更换。清洁移液头外部。

　　机械部件检查：检查机械臂、导轨、皮带等运动部件有无松动、磨损或异物，根据需要进行润滑（使用指定润滑油）。

　　性能验证：定期（如每周或每月）进行移液体积的准确性、精确性验证。

　　3.长期/预防性维护

　　遵循制造商计划：严格按照制造商推荐的维护时间表（如每6个月、每年）进行专业维护。

　　关键部件更换：定期更换易损件，如泵管（如果有）、密封圈、过滤器等。

　　专业校准：定期（通常每年）由厂家或认证工程师进行全面的性能校准和检查。

　　4.注意事项

　　断电操作：进行任何内部清洁或维护前，务必关闭仪器电源并拔掉电源线。

　　使用原厂耗材：强烈建议使用制造商推荐或认证的吸头和耗材，以保证最佳性能和避免损坏移液头。

　　避免腐蚀性液体：切勿让强酸、强碱或有机溶剂接触仪器的非耐腐蚀部件。如果意外接触，立即用大量清水冲洗并彻底擦干。

　　防尘防潮：不使用时，用防尘罩覆盖仪器。

　　记录：详细记录所有维护、校准和维修活动。

　　1.药物研发

　　药效评估：自动制备一系列浓度的药物溶液，用于测试药物对细胞或生物靶点的抑制或激活效果，绘制剂量效应曲线，计算半数抑制浓度（IC50）或半数有效浓度（EC50）等关键药理参数。

　　高通量筛选：在新药筛选初期，面对成千上万的化合物库，可快速、自动化地进行梯度稀释，用于筛选具有潜在活性的先导化合物，极大提高筛选效率。

　　药代动力学研究：处理生物样本（如血浆、血清）中的药物浓度，制备标准曲线和质控样品，用于分析药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程。

　　2.生物学与生命科学研究

　　细胞实验：为细胞增殖、毒性、凋亡等实验精确配制不同浓度的刺激因子、抑制剂或药物。

　　酶学分析：制备底物或抑制剂的浓度梯度，用于研究酶的动力学特性（如米氏常数Km的测定）。

　　分子生物学：在定量PCR（qPCR）前，对模板DNA或cDNA进行精确的梯度稀释，用于构建标准曲线，实现基因表达的绝对定量。

　　免疫学实验：如ELISA实验中，用于制备标准品或抗体的系列稀释，以建立标准曲线，对样本中的抗原或抗体进行准确定量。

　　3.临床检验与诊断

　　样本前处理：对于浓度过高的临床样本（如血液、尿液中的某些标志物），自动进行稀释，使其浓度落入检测设备的线性范围内，保证检测结果的准确性。

　　标准品与质控品制备：自动化配制用于校准仪器和监控检测过程稳定性的标准溶液和质控样品，提高检验的标准化和可靠性。

　　4.食品与环境安全检测

　　污染物检测：在检测食品或环境样本（水、土壤提取液）中的农药残留、兽药残留、毒素或重金属时，对提取液进行梯度稀释，确保最终检测浓度在检测试剂盒或仪器的检测范围内。

　　微生物定量：结合微生物检测方法，对样本进行梯度稀释，用于活菌计数或病原微生物的定量分析。

　　5.质量控制与生产

　　工业生产：在生物制药、试剂生产等领域的质量控制环节，用于自动化、标准化地制备校准品、对照品或进行产品效价的测定，确保批次间的一致性。