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等温滴定为量热仪阅读:3029

    等温滴定量热法(Isothermal Titration Calorimetry, ITC)是近年来发展起来的一种研究生物热力学与生物动力学的重要方法,它通过高灵敏度、高自动化的微量量热仪连续、准确地监测和记录一个变化过程的量热曲线,原位、在线和无损伤地同时提供热力学和动力学信息。

应用范围

    蛋白质-蛋白质相互作用(包括抗原-抗体相互作用和分子伴侣-底物相互作用);蛋白质折叠/去折叠;蛋白质-小分子相互作用以及酶-抑制剂相互作用;酶促反应动力学;药物-DNA/RNA相互作用;RNA折叠;蛋白质-核酸相互作用;核酸-小分子相互作用;核酸-核酸相互作用;生物分子-细胞相互作用;……

    加样体积:(实际体积)cell:1.43 ml,syringe:300 μl

    准备样品体积(最少量)cell:2 ml,syringe:500 μl

    样品浓度cell:几十μM到几mM

    syringe:几百μM到几十mM

    测量Kb范围102-1012 M-1

    滴定实验前恒温30-60 min

    等温滴定量热实验所需时间,一般1.5-4 hr

    技术指标:

    短期噪音水平:0.5纳卡/秒 (2 纳瓦)。

    基线重复性:优于±20纳瓦/小时 。

    工作温度: 2 ℃ 到 80 ℃。

    最小响应时间: 17秒

    可选择化学反应的响应时间: 多种选择(专利技术) 。

    搅拌速度有多种选择。

    控温方式:Peltier电子控温方式,快速达到控制温度,不需水浴。

    样品池材质:铪合金 ,1.3 ml , 固定式。

    检测方式:功率反馈式,负反馈补偿,直接测定热量。

    配置:

    超灵敏量热仪主机, 工作软件, 进样、清洗装置, 基本附件。

    仪器设备的先进性和实用性:

    适用学科范围: 物理化学、生物化学、生物物理、化学生物学、生命科学、药物学、土壤学、胶体化学 等。

    该仪器的特点和优势 :

    1.该型号仪器的检测原理为功率反馈式, 功率负反馈补偿,直接测定热量, 测得的结果直接, 准确 。

    2.仪器的灵敏度,短期噪音水平0.5纳卡/秒 (2 纳瓦), 样品量可以低至微克级 。

    3.该仪器可选择化学反应的响应时间, 从而能提供研究多样性反应过程的可能性。

    4.该型号仪器使用时无其它消耗品需求, 不需固定化、不需修饰, 对包括混悬液、带颜色的样品、一定黏度的样品体系等都可适用。

    5.该型号仪器的控温方式为Peltier电子控温方式,可快速达到控制温度,不需水浴, 控温精度高。

    6.该型号仪器的软件功能全面,的控制和数据处理软件(VPViewer, Origin 7.0 )包含目前所发现的全部反应模型和数据解析模型。

    7.全球引用该仪器产生的数据而发表的文献, 占同类文献的份额为95%以上。

    该仪器设备对环境的要求:洁净, 避免强光、电场、磁场、气流波动、震动。

ITC用途

    获得生物分子相互作用的完整热力学参数,包括结合常数、结合位点数、摩尔结合焓、摩尔结合熵、摩尔恒压热容,和动力学参数(如酶活力、酶促反应米氏常数和酶转换数)。

方法定义

    微量热法具有许多独特之处。它对被研究体系的溶剂性质、光谱性质和电学性质等没有任何限制条件,即具有非特异性的独特优势,样品用量小,方法灵敏度和精确度高(本仪器最小可检测热功率2 nW,最小可检测热效应0.125uJ,生物样品最小用量0.4ug,温度范围2 ℃ - 80 ℃,滴定池体积(1.43 ml)。实验时间较短(典型的ITC实验只需30-60分钟,并加上几分钟的响应时间),操作简单(整个实验由计算机控制,使用者只需输入实验的参数,如温度、注射次数、注射量等,计算机就可以完成整个实验,再由Origin软件分析ITC得到的数据)。测量时不需要制成透明清澈的溶液, 而且量热实验完毕的样品未遭破坏,还可以进行后续生化分析。尽管微量热法缺乏特异性但由于生物体系本身具有特异性,因此这种非特异性方法有时可以得到用特异方法得不到的结果,这有助于发现新现象和新规律,特别适应于研究生物体系中的各种特异过程。

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